四虎成年永久免费网站-四虎成人4hutv影院-四虎成人www国产精品-四虎成人国产精品视频-四虎成人精品-四虎成人精品国产一区a

您好,歡迎進入上海力敏實業有限公司網站!
一鍵分享網站到:
您現在的位置:首頁 >> 技術文章 >> 抗體純化
抗體純化
瀏覽次數:5597發布日期:2012-04-26

低于血清、腹水和組織培養上清的澄清,離心和過濾是基本的實驗室技術,這些技術可以去除會阻塞曾吸住的脂類和小顆粒物質。對于某些樣品,緩沖液置換和除鹽也是必要的步驟。硫酸銨沉淀作為更進一步的預處理步驟,經常用于濃縮腹水中的免疫球蛋白。

一、抗血清

多克隆抗體有時不經純化的,稱為血清和抗血清。抗血清是指已經除去了凝血蛋白和血紅細胞的免疫宿主的血液。抗血清包含所有種類的抗體、免疫球蛋白以及其他血清蛋白。它所包含的不僅有識別靶抗原的抗體,還有識別非靶抗原的抗體,在免疫分析中有時會發生非特異性反應。由于這個原因,粗制抗血清通常要進行純化,以去除血清蛋白,增加能特異和靶抗原相結合的免疫球蛋白的比列。

二、組織培養上清

單克隆抗體可以通過雜交瘤細胞培養(細胞分泌性抗體)并收獲雜交瘤組織上的培養上清來獲得。

三、腹水

單克隆抗體可以通過在小鼠的腹腔中生長雜交瘤細胞而產生。雜交瘤細胞注射入小鼠后,就會在小鼠腹腔繁殖并產生液體(腹水),這種腹水就包含了高濃度的可收獲抗體,比雜交瘤細胞培養有更高的抗體量。

四、抗體純化

多克隆抗血清或單克隆腹水、組織培養上清通常通過以下三種方法的一種來進行純化。

1、蛋白A/G純化

蛋白A/G純化是應用金黃色葡萄球菌的蛋白A或鏈球菌的蛋白G對免疫球蛋白Fc段的高親和性。蛋白A/G純化從粗制抗血清中去除了血清蛋白,但沒有去除非特異的免疫球蛋組分。結果蛋白A/G純化的抗血清仍然具有一小部分不期待的交叉反應性。

2、親和純化

親和純化是通過相似性分離某一特定蛋白或具有相似特征的一組蛋白。這種分離蛋白的技術是基于在蛋白和耦合于層析介質上的特定配基之間的一種可逆的相互作用。抗原親和純化是利用免疫球蛋白能夠特異性地同刺激它產生抗原進行結合的特點,消除了大量的非特異免疫球蛋白成分,把與目標抗原特異結合的免疫球蛋白富集。因此親和純化后獲得的主要是含目標特異性免疫球蛋白。

3、前吸收

多克隆抗體有時要經過前吸收,也就是說它們要被不同物種來源的其它蛋白或血清吸收,以消除可能的交叉反應的抗體。這樣純化后的抗體春都和特異性都很高,任何交叉反應都被顯著減少。

  • 上一篇:Western Blotting印跡膜的選擇
    下一篇:沒有了
  • 主站蜘蛛池模板: 国产精品网站在线观看 | 亚洲手机中文字幕 | 日本视频免费高清一本18 | 亚洲产国偷v产偷v自拍涩爱 | 日本一区二区在线播放 | 国产日产欧产美一二三区 | 中文字幕亚洲欧美一区 | 青青青免费视频观看在线 | 欧美日韩国产手机在线观看视频 | 亚洲一区二区三区久久 | 国产最爽的乱淫视频国语对白 | 国产综合色在线视频区 | 一区二区视频网 | 精品久久久久久久久久 | 天天射天天搞 | 三中文乱码视频 | 人超级碰碰视频在线观看 | 国产精品欧美亚洲 | 久久久久久全国免费观看 | 欧美在线视 | 老妇性xxxxxhd| 亚洲国产成人精品不卡青青草原 | 久久精品国产99国产精品亚洲 | 欧美日韩亚洲在线观看 | 欧美日韩中文在线视频 | 国产精品免费精品自在线观看 | 亚洲国产精品综合福利专区 | 亚洲大片免费 | 久久网免费 | 操爽爽| 日韩成人综合网 | 水蜜桃视频网站 | 国产九九精品视频 | 波多野结衣久久 | 国产大片91精品免费看3 | 色综合色综合 | 天天色综合1 | 99pao在线视频精品免费 | 国产一区二区三区四区在线观看 | 在线欧美精品国产综合五月 | 亚洲精品123区 |